動物源（yuán）性食品中細（xì）菌的檢測——分枝杆（gǎn）菌（jun1）屬

分枝杆（gǎn）菌屬（Mycobacterium）的細菌在自然界中（zhōng）分布廣泛，包括結核分枝杆菌、牛分枝杆菌（jun1）、禽分枝杆菌和副結核分枝杆菌等。其中，結核分枝杆（gǎn）菌與牛分枝杆菌（Mycobacteriumbovis）被歸類為結核分枝杆菌複合物（M.tuberculosis complex），是引起人和牛等動物結核病的主要病原菌。結核病是（shì）一種慢性（xìng）消耗性疾病，其（qí）病理特點是在多（duō）種組織器官形成肉（ròu）芽腫和幹酪樣、鈣（gài）化結節病變（biàn）。有資料表明，牛結核（hé）病中有7%是（shì）結核分枝杆菌感染，而結核病人中106%為牛（niú）分枝杆菌感染。世界上結核病人中約有15%是通過飲用了結核病牛的乳而患病的，因此乳和乳製品中結核（hé）分（fèn）枝杆菌的檢驗尤為重要。

1 病原學特征（zhēng）

結核分枝杆菌和牛分（fèn）枝杆菌是分枝杆菌（jun1）屬的主要動物致病菌，也是可以引起人的結核（hé）病的病原菌。該菌為細長、直（zhí）或微彎的杆菌（jun1），大小為（0.2～0.5）μm×（1.5～4.0）μm，單在、少數成叢。牛分枝杆菌菌體短而粗。與一般革蘭氏陽性菌不同，該菌的（de）細胞壁不僅有肽聚（jù）糖（táng），還有特殊的糖（táng）脂。糖脂的影響致使革蘭（lán）氏染色不（bú）易著色，而抗酸染色為紅色。

該菌為專性需氧菌，對營養要求嚴格，最適（shì）pH為（wéi）6.4～7.0，最適溫度為37～37.5℃，生長（zhǎng）緩慢，特別是初代培養，一般需10～30d才能（néng）看到菌落。菌落粗（cū）糙、隆起、不透明、邊緣不（bú）整齊，呈顆粒、結節或花菜狀，乳白色或米黃色。結核分枝杆菌不發酵糖類，可（kě）合成煙酸（suān）和還原硝酸（suān）鹽，牛分枝杆菌無此特性。分（fèn）枝（zhī）杆菌對外界環境抵抗力很（hěn）強，在幹燥的環境中可存活6～8個月。

2 流（liú）行病學特征

患病的（de）人和（hé）動物（wù）是主要傳染源。結核分枝杆菌隨鼻液、痰液、糞便和（hé）乳汁（zhī）等排出（chū）體外，汙染（rǎn）飼料、飲（yǐn）水、空氣等周圍環境，使其在人畜（chù）之間相互傳播。人結核病可以傳染給牛，成年牛多因與病人、病牛直接接觸而感染。分枝（zhī）杆菌主要通過呼吸道侵入易感機體，消（xiāo）化（huà）道或皮膚損傷時也可以侵入易感機體，引（yǐn）起多種組織器官的結核病。人和多種動物都可以感染該病，在家畜中，牛最易感染（rǎn）結核病，特別是奶牛，其次是水牛、黃（huáng）牛。其中人通過呼吸道感染肺結核為最多，人（rén）結核病的存在嚴重製約著牛結核病的（de）徹底消滅。牛結核病又能傳染給人，人們（men）飲用未經消毒或消毒不完全的患病（bìng）牛的乳就可能被傳（chuán）染，引起人結核病的流行（háng），所以牛（niú）結核病的存在嚴重威脅（xié）著人類的健（jiàn）康。而人畜結核病的交叉傳播則造成了分枝杆菌的廣泛流行。

該病一（yī）年四季都可以發生，沒有季節性。

3 危害

結核分枝杆菌和牛分（fèn）枝杆菌可感染人和多種（zhǒng）動物導致結核病，是一種慢性消耗性人畜共患病。

人感染分枝杆菌的主要表現為（wéi）呼吸道疾病的症狀，如咳嗽、咳痰等，後逐步伴有胸痛、胸悶、咯血（xuè）等症狀，當體內結核分枝杆菌數量較大時才（cái）會出現全身症狀，如乏力、低熱、麵部潮紅、厭食、消瘦等（děng），還會出（chū）現關節疼痛等。

牛感染分枝杆菌的主要表現為（wéi）進行性消瘦、咳嗽、慢性（xìng）乳腺炎、頑固性腹瀉、體表（biǎo）淋巴結慢性（xìng）腫脹等（děng），結核（hé）病給畜牧業尤其是乳業造成巨大的經濟損失。牛結核病被我國列為牛病中的（de）二類動物疫病。

4 分枝杆菌的檢驗方法

4.1 塗片檢查

在分枝杆菌的微生物檢驗中，塗片法抗酸染色後鏡檢是最直接的方法（fǎ）。

用無菌（jun1）注射器直接吸取鮮乳5～10mL置離心管中，生鮮牛乳樣品（pǐn）在混勻器上中混勻後（或者無菌取乳粉（fěn）樣品5g放入滅菌燒杯中，加50mL生理鹽水，劇烈振蕩混勻），經4000r/min離心40min，棄上清液，加入0.5mL滅菌生理（lǐ）鹽水重懸沉澱，塗片，齊爾-尼爾森（Ziehl-Neelsen）染色法抗酸染色後鏡檢，如發現紅色成叢杆（gǎn）菌，可做出初步診（zhěn）斷。其他細（xì）菌和細胞呈（chéng）藍色。報（bào）告方式見下表。

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