摘要:鹽酸(suān)克倫特羅,俗名“瘦肉精”,在動物體內能增強(qiáng)脂解和減慢蛋白質分(fèn)解代謝,具有(yǒu)調節營養(yǎng)物質的流向和重新分配的作(zuò)用,在畜牧生(shēng)產中大(dà)劑量使用可(kě)明顯提高飼料轉化率和瘦肉(ròu)率,但其殘留在動物組織中,人食用後會對肝、腎等內髒器官產生(shēng)毒害,甚至引起(qǐ)死亡,已引起國內外的高度重視。本文就目前國內外檢測鹽酸克倫特羅的主要方法及進展情況進行(háng)綜述。 關鍵(jiàn)詞:鹽酸克倫特羅;瘦肉(ròu)精;酶免疫(yì)分析技術
鹽酸克倫特羅(clenbuterol,CLB),俗名(míng)“瘦肉精”,化學名為(wéi)“2-[(叔丁氨基)甲(jiǎ)基]-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇(chún)鹽酸(suān)鹽”,藥品名為“克(kè)喘素”,是一種β2-腎上(shàng)腺素能激動劑。20世紀70年代末,美國(guó)等發達國家開始了將CLB用作“營養(yǎng)重分配劑”及“促生長劑”的實用性開發研究;80年代被廣泛應用到畜禽生產中。CLB在動物體內能增強脂解和減慢蛋白質分解代謝,具有調節營養物質的流向和重新(xīn)分配(pèi)的作用,若在畜牧生產中大劑量使用(yòng)可明顯提高飼料(liào)轉化(huà)率和瘦肉(ròu)率,因而在畜牧行業被俗稱為“瘦肉精”。CLB殘留在動物組織中,人食用後會對肝、腎等內髒(zāng)器官產生毒害,出現心悸、頭(tóu)痛、目眩、惡心、嘔吐、心率加快、肌肉振顫等症(zhèng)狀,嚴重者甚至死亡。近年來動物性產品中CLB殘留(liú)對(duì)人類健康造成的危害(hài)和對生態食物(wù)鏈所造成(chéng)的破壞已經引起高度的(de)重視。下麵就目前國內外(wài)檢測CLB的主(zhǔ)要方法及進展情況作一綜(zōng)述。 1 樣品的選擇 CLB在肌(jī)肉、肝髒、肺(fèi)髒(zāng)、腎髒(zāng)、眼(yǎn)球的殘留(liú)量多(duō),殘留維持時間較(jiào)長,但是這些樣品(pǐn)預(yù)處理過程複雜,難(nán)於(yú)操作;而CLB在血漿中濃度較低,維持時(shí)間短,所以(yǐ),都不是檢測(cè)CLB殘留的(de)理想樣品。但CLB有良好的熱穩定性,在體內不會被破壞分解(jiě),大量(liàng)以原形由尿液排出(chū),尿液中CLB的濃度比血漿中高40倍(bèi),可實現宰前(qián)檢測,所以尿液是檢測CLB的較好的樣(yàng)品。CLB能特異地與毛發、羽毛中的色素牢固結合,而且(qiě)殘留量大、維持時間長、采集方便,也適合宰前檢測,所(suǒ)以毛發、羽(yǔ)毛是檢測CLB非法使用最好的樣品。因此,建議應用毛樣、尿樣來檢測CLB更為合理(lǐ)和(hé)理(lǐ)想。 2 樣品前處理 尿樣經4500轉/分離心10分鍾,取上(shàng)清液可直接用於檢測;但是組織樣品檢測前必須進行(háng)複雜的樣(yàng)品前處理,對組織中殘(cán)留的CLB加以提取、純化、濃縮。常規方法主要有4種:液-液萃取法、固相萃取法(SPE)、免疫親和色譜法(IAC)、基質(zhì)固相分(fèn)散法(MSPD),其中固相萃(cuì)取法為許多(duō)實驗室廣泛采用,該法可成批處理樣品,實現自(zì)動化,溶劑用量少,費時少。 3 檢測方法 目(mù)前,檢(jiǎn)測CLB殘留的方法(fǎ)主要有四種,即高效液相色譜(pǔ)法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(CG-MS)、毛(máo)細管區帶電泳法(CE)和(hé)免疫分析技術(IA)。 3.1 高效液相(xiàng)色譜(pǔ)法(HPLC) HPLC適合測定熱不穩定和強極性的β-激動劑及其代謝產物,而且,HPLC可以(yǐ)與柱前提取、純化及柱後熒光衍生化反應和質譜(MS)等係統(tǒng)聯用,容易實現分析過程的自動化。黃士新等(1995)應用紫外檢測器,在λ=243nm,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱溫:室溫(wēn)30℃的條件下(xià)檢測豬肝髒(zāng)和豬肉中的CLB殘留,最低檢測限可達(dá)2ng/g[4]。國外有人應用HPLC (二極管陣列檢測器)測定動物性食品中CLB殘留,測得(dé)最低檢測限為1.26ng/g,回收率達98.9%[5]。目前,我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方(fāng)法,最低檢測限範圍(wéi)為1~15ng/g,其優點是專屬性好、選擇性(xìng)強、檢測精確(què)度較(jiào)高,而且假陽性率低;缺點是樣品處理時間長,檢測過(guò)程煩(fán)瑣、難於(yú)操(cāo)作,需貴重儀(yí)器,在實際應(yīng)用中受到(dào)一定的限製。
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