動物源性食品中細菌的檢測——金黃色葡萄（táo）球菌

      金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus，S.aureus）是一種重要病（bìng）原菌，隸屬於微球菌科Micrococcaceae）、葡萄球菌屬（Staphyloccocus），在《伯傑氏係統細（xì）菌學手冊》（Bergey’s manua lof systematic bacteriology）（2004））中金（jīn）黃色葡萄球菌被分為19個種，能夠引起多種嚴重感染，由金黃色葡萄球菌引起（qǐ）的食物中毒時有發生。據美國疾病控製與預防中心（xīn）報告，在美國由（yóu）金黃（huáng）色葡萄球菌引起的細菌（jun1）性食物中毒（dú）病例數量居第二位，占整個細菌性食物中毒的33%，加拿大則高達45%，由此而造成（chéng）的（de）經（jīng）濟損失也相當慘重。由金黃色葡萄球（qiú）菌腸毒素引起的（de）中毒暴發事件首推2000年日本“雪印奶粉”事件，該事件（jiàn）造成14000多人（rén）受感染。目前世界各國都把金（jīn）黃色葡萄球菌列為（wéi）食品衛生的法定檢測項目。

  1 病原學特征

  典型的（de）金黃色葡萄球菌為圓形（xíng），直徑0.5～1.5μm，排列（liè）成葡萄串狀，在濃汁或生長在液體培養基上的球菌常（cháng）呈雙球或短鏈排列（liè）。金黃色葡萄球菌無芽孢，無鞭毛，大多數無莢膜，有的形成莢（jiá）膜或（huò）黏液層。革蘭氏染（rǎn）色陽性，但衰老、死亡或被白（bái）細（xì）胞吞噬及耐青黴素的菌株呈陰性。

  金黃（huáng）色葡萄球菌對營養的要（yào）求不高，在（zài）普通培養基上生長良好，需氧或兼性厭氧，最適生長溫度37～40℃，最適（shì）生長pH7.4，在幹燥環（huán）境下可存（cún）活數周，可在普通瓊脂平板培養基和血瓊脂平板培養基上（shàng）生長，不能在麥康凱培養基上生長。在普通瓊脂平板培養基上形成濕潤、光滑、隆起的圓形菌落，菌落厚、有光澤、圓（yuán）形凸（tū）起，直徑1～2mm，在血瓊脂平（píng）板培（péi）養基上形成的菌落較大。血瓊脂平板培養基（jī）上的菌落周圍形成透明的溶（róng）血（xuè）環。金黃色葡萄（táo）球菌有高度的耐鹽性，可在10%～15%氯化鈉肉湯中生長。可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產酸而不產氣。甲基紅試驗陽性，VP試驗弱（ruò）陽性。

  2 流（liú）行（háng）病學

  金黃色葡萄球菌（jun1）在自然界中無處不在，在空氣、水、灰塵（chén）、人和動物的排泄物中均（jun1）可找到（dào）。人（rén）和動（dòng）物的鼻腔、咽喉、皮（pí）膚、腸道帶菌（jun1）率比較（jiào）高，是（shì）造成該菌（jun1）汙染食（shí）品（pǐn）的重要來源。食（shí）品加工者的手不清潔也（yě）能成為常見的汙染來源。葡萄球菌食物（wù）中毒多（duō）見於（yú）夏秋季節。適宜葡萄球菌繁殖和產生腸毒素（sù）的食品主要是動物源性食品和含澱粉的食品。

  3 危害

  金黃色葡萄球菌常引起兩類疾病：一類是化膿性疾病。它是化膿感染中最常見的（de）病原菌，可引起局部化（huà）膿感染，也可（kě）引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血症、膿毒症等全身感染。另一類是毒素性疾病。如果汙染的食品含有葡萄球菌腸毒素，還會發生食物中毒，表現為進食含腸毒素食物後1～6h即可（kě）出現（xiàn）症狀，如惡心、嘔吐、腹痛、腹（fù）瀉，大多數病人於（yú）數小時至1d內恢複。金黃（huáng）色葡萄球菌的致病性主要（yào）取決於其產生的毒素和（hé）酶。

  溶血毒素：是一種外毒素，分（fèn）為α、β、γ、δ四種亞型，能破壞血小板，使白細胞等崩解，並能作用（yòng）於（yú）血管壁的平滑肌細（xì）胞，使（shǐ）平滑肌收縮（suō）、麻痹、壞死，引起機（jī）體局部缺血和壞死。

  凝固酶：當金黃色葡（pú）萄球菌（jun1）侵入（rù）動物機體後，該（gāi）酶使血液中的纖維蛋白凝固沉（chén）積於（yú）菌體表麵，與菌體相交聯，阻礙吞噬細胞的吞噬作（zuò）用。金黃（huáng）色（sè）葡萄球菌形成的感染具有局部性的特點與凝固（gù）酶有關。

  耐熱核酸酶：由致病菌株產生（shēng），耐受高溫，可作為（wéi）檢測致病菌株的重要指標（biāo）。此酶能迅（xùn）速分解核酸，利於（yú）病菌擴散。

  腸毒素：可引起人類食物中毒，刺激嘔吐中樞，表現嘔吐並腹（fù）瀉。

  4 檢驗方法

  4.1 細菌分離鑒定

  （1）儀器與材料 顯微鏡（jìng）、恒溫培養箱、冰箱、恒溫（wēn）水（shuǐ）浴箱、天平（感（gǎn）量0.1g）、均質器、振蕩器、無（wú）菌（jun1）吸管或微量移液器及吸頭、無菌錐形瓶、無菌培養皿、注射器、pH計或（huò）精密pH試紙、接種環、L形塗（tú）布棒等。

  （2）培養基和試劑 10%氯化鈉（nà）胰酪腖大豆肉湯、7.5%氯化鈉（nà）肉湯、血瓊脂平（píng）板、Baird-Parker瓊脂平板、腦心浸出（chū）液肉湯（BHI）、兔血（xuè）漿（jiāng）、磷酸鹽緩衝液、營養瓊脂小斜（xié）麵、革蘭氏染（rǎn）色液、無菌生理鹽水。

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