禽病實驗室藥敏檢測（cè）流程（chéng）與方法

禽病（bìng）實驗室藥敏檢測是評估病原菌對抗菌藥物敏感性的重要手段，可指導臨床合理用藥。以下是其標（biāo）準流程與方（fāng）法的概述。

一、藥敏檢測基本流程（chéng）

1.樣本采集與處理

樣本類型：病禽的病變組織（如肝、脾、肺）、血液、分泌物（氣管拭子、泄殖腔拭子）或分離純化的病原菌。

無菌操作：采集時避免汙（wū）染，樣本冷藏（4℃）或立即送檢（2小時內）。

預（yù）處理：組織樣本需研磨後懸浮（fú）於生（shēng）理鹽水（shuǐ）或肉湯培養基中。

2.病原分離與鑒定

分離培養：根據疑似病原（yuán）選擇（zé）培養基（如（rú）血瓊脂、麥康凱瓊脂、支原體專用培（péi）養基）。

純（chún）化培養：挑取單一菌落多次傳代，確保菌株（zhū）純度。

鑒定方法：

形態學觀察（染色鏡檢）；

生化試驗（如（rú）氧（yǎng）化（huà）酶、糖發酵試（shì）驗）；

PCR或基因測序（如16S rRNA鑒定細菌，特異性引物檢測病毒或支原體）。

3.藥敏試（shì）驗方法選擇

常用方（fāng）法：

紙片擴散法（Kirby-Bauer法）：適用於（yú）快速篩選；

微量稀釋法（MIC測定）：定量測定最低抑菌（jun1）濃度；E-test法：結合紙片擴散和稀釋法的（de）優點，直接讀取（qǔ）MIC值（zhí）； 自動化藥敏（mǐn）係（xì）統（如VITEK、Phoenix係統）：高通量（liàng）檢（jiǎn）測。

4.藥敏（mǐn）試驗操作步驟

以紙片擴散法為例：

製（zhì）備菌懸液：挑取純培養菌落，用生理鹽水或肉湯調至0.5麥氏濁度（約1×10⁸ CFU/mL）。

塗布平板：均勻塗布於（yú）M-H瓊脂（細菌）或專用（yòng）培養基（如支原體SP4培養基）。

貼藥敏紙片：無菌鑷子將藥敏紙片間隔15mm貼於瓊脂表麵。

培養：細菌37℃培養16-24小時，支原（yuán）體需延長至48-72小時。

結果判讀：測量抑菌圈直徑，參照CLSI（美國臨床實驗室標（biāo）準化協會）或EUCAST標準判定敏感（S）、中介（I）、耐藥（R）。

5.結果分析與報告

記錄各（gè）藥（yào）物抑菌圈（quān）直徑或MIC值，生（shēng）成藥敏譜。

結合臨床用藥習慣、藥物代謝特性（如組織穿透性、半衰期）提出用藥建議（yì）。

二、常（cháng）用藥敏檢測方法詳解

1.紙片擴（kuò）散法

優點：操作簡單、成本低，適合基層實驗室。

局限性：無法定量，對慢生（shēng）長（zhǎng）菌（如支原體）靈敏度低。

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