時間:2009-12-23 點擊: 次 來源:蜗牛视频app畜牧網 作者:佚名 - 小(xiǎo) + 大
凝集試驗的原理是:顆粒抗原(紅細胞(bāo)、細菌、病毒等)與含有相應抗體的血清混合,在電解質的參與下, 則能發生(shēng)特異性(xìng)結合,形成抗原抗體複合物,這種複合物呈均勻狀態懸浮於液體中,這時肉眼是看不見的,當抗原抗體複合物在一定濃(nóng)度的電解質作用下,複(fù)合物表麵的電荷大部分被消除,失去了互相排斥(chì)的作用,複(fù)合物之間互相吸引,凝集成(chéng)團(tuán),即出現肉眼可見的凝集現象。作用於(yú)凝集反應的抗原,稱為凝集(jí)原,與之相結合的抗體,稱為凝集素。 凝集反(fǎn)應按其原理可分為直接凝集反應和間接凝集反應兩(liǎng)類。用於豬病診斷的常用(yòng)操作方法有(yǒu)以(yǐ)下幾種。 (1)全血平(píng)板凝集試驗 本試驗在實踐中主要(yào)用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原(經分離培養(yǎng)後)的鑒定。現舉例用已知(zhī)豬丹毒(dú)抗原(丹毒杆菌(jun1)的純培養液)測定被檢豬血(xuè)清中的抗體。其(qí)操(cāo)作步驟如下: ①材料 豬丹毒凝集抗原,玻片,9號針頭,酒精棉球(qiú),酒精燈,鉛耳(取血環)等。 ②操作 用鉑耳取已知抗原1滴,置於玻片上。用酒精棉球擦拭針(zhēn)頭,鉑耳在酒精燈上灼(zhuó)燒消毒。用針(zhēn)頭刺破被(bèi)檢豬的耳靜脈,以鉑耳取血與玻片上(shàng)的(de)抗原等量混合,在2-3分鍾(zhōng)內觀(guān)察結(jié)果。 ③結果判定 出現(xiàn)顆粒狀的凝集,為陽性反應。否則(zé)為陰性(xìng)。 (2)試管凝集(jí)試驗 試管凝(níng)集試驗(yàn)是一種定量法,用於測定被檢血(xuè)清或其他體液中有否某種抗體(tǐ)及其效價,可作臨床(chuáng)的輔助診斷,或用於流行(háng)病學監測。在豬場中,本法常用於豬布氏杆菌病的診斷。 ①材料 布(bù)氏杆菌病試管凝集抗原(1:20倍稀釋),布氏杆菌病陽性血(xuè)清(qīng)、陰性血清(1:25倍稀釋),稀釋液(0.5% 石炭酸生理鹽水),滅(miè)菌小試管,1毫升吸管,試管架,待檢(jiǎn)血清等。 ②操作(zuò) 取試管7支置於試管架上,設陽性和(hé)陰性血清及抗原對照(zhào)各1支,測定管4支,以後每增加一個樣品,隻需(xū)增加(jiā)4支測定(dìng)管。 按表2示意稀釋血(xuè)清,加(jiā)抗原,完成(chéng)後每支管內應含 1毫升液體。 加入抗原後,將試(shì)管充分振蕩,置37℃溫箱反應24小時後(hòu),判定(dìng)結(jié)果。 ③判定標準 "一" 液體均勻混(hún)濁,管底無凝集物,不凝集。 "+" 液體透明度較差,管底有少量凝集物,為25%凝集。 "++" 液體(tǐ)中等混濁(zhuó),管(guǎn)底有中等量的傘狀沉澱,50%菌體凝(níng)集。 "+++" 液體幾乎透明,管底有明顯傘狀沉澱,75%菌(jun1)體凝(níng)集。 "++++" 液體完全透明,管底出現大片的傘狀沉澱,100% 菌體凝集。 結果判定:以出(chū)現50%菌(jun1)體凝集的血清(qīng)最高稀釋度為該血清的凝集價。在檢測豬布(bù)氏杆菌病(bìng)時(shí),血清凝集(jí)價在(zài)1:50以上時,可判為陽性反應,若(ruò)凝集價為1:25則為可疑(需複試(shì)驗1次)。如豬群中基(jī)本無(wú)陽性反應,則凝(níng)集價1:25也可判為陰性。 |
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