時間：2009-12-23 點擊： 次 來源：蜗牛视频app畜牧網 作者：蜗牛视频app（guāng）畜牧網 - 小 + 大
| 豬（zhū）的細菌（jun1）性（xìng）疾病種類很多,危害不小,常見的（de）細菌病有仔豬黃痢、白（bái）痢、豬水腫病、副（fù）傷寒、豬丹毒、豬肺疫、鏈球菌病（bìng）等,其中有的疾病可以一目了然(如（rú）仔豬黃痢、白痢等),易於診斷,有些疾病（bìng）則一時難以確診(如副傷寒、豬接觸傳染性胸（xiōng）膜 肺炎等),而更多的細菌（jun1）病是並發（fā）或繼發感染的,為了做到及時、正確地診斷豬病,規模（mó）化的豬場（chǎng）有必要開展細菌的分離、培養和鑒定工作,同時還（hái）可將分離出的細菌,通過抑（yì）菌試驗篩選出敏感性強、療效好的抗菌藥物進行治療。掌握了細菌學的檢查技術,還可開展對豬舍消毒效果的測定,飲用水、飼料中的細菌學（xué）檢（jiǎn）查等項工作。 規模化豬場的化驗室開展這項（xiàng）工作,需要一定的設備和條件,操作人員應該具備獸醫微（wēi）生物學的基本知識和實驗室的操作技（jì）術、要求做到正確、熟練,其內容包括病料的采集,細菌的分離培養,形態（tài）觀察,生化試驗和動物接種試（shì）驗等。 下麵以豬肺疫的病原-多殺性巴氏（shì）杆菌的分離、培養（yǎng）和鑒定為例,作簡要介紹。 1.采樣與病原分離 豬肺疫病（bìng）原為多殺性巴氏杆菌,臨診上可分為3型（xíng）：最急性型,見於流（liú）行初期,常無（wú）明顯的症狀而突（tū）然死亡；急性型,較為常見（jiàn）,多呈急性胸膜肺炎（yán）症狀,病（bìng）程 3－5天；慢性型主要表（biǎo）現為慢性肺炎的症狀。 (1)病（bìng）料的（de）采取 生前（qián）采取血液、水腫液，死後（hòu）無菌操作采取心血、肝、脾、淋巴結、骨髓或肺部病灶等（děng）。 (2)病料的處理 髒器或淋巴（bā）結應先作表麵除雜，將（jiāng）組織塊（kuài）浸漬於95%酒精中立即取出（chū），引火自（zì）燃,這樣反複2－3 次,或在沸水中（zhōng）浸燙數秒鍾,然後用滅菌刀剖切，其剖（pōu）麵在血瓊脂平（píng）板（bǎn）一側（cè）塗抹,麵積是（shì）平板的1/5。再用鉛耳在塗層上劃抹分離,分離時應塗抹數個平板,以提高（gāo）檢出機會。 (3)直接鏡檢 血液作推片,其他髒器以剖麵作塗片各若幹片,用數片以甲醇固（gù）定作革蘭（lán）氏染色,另數片作瑞氏或美藍染色（sè）。如發現（xiàn）大量革蘭氏陰性、兩端鈍圓、中央微凸的（de）短小杆菌,即可初步確（què）診。本菌（jun1）無鞭毛（máo）,不能運動,能形成莢膜。單染菌體呈卵圓形,兩（liǎng）端著色深,中央著色淺,好像兩個並列的球菌,故有兩極（jí）杆菌之稱。病料用（yòng）印度墨汁染料染色,可清晰地見到細（xì）菌的莢膜。 (4)分離培養 最（zuì）好用麥康凱瓊脂和鮮血瓊脂平板同時進行分（fèn）離培養,本菌在麥康凱瓊脂上不生長,而在鮮血瓊脂平板上,培養24小時後,可長成淡灰白色、圓形（xíng）、濕潤、不溶血（xuè）的露珠樣小菌落。塗片（piàn）染（rǎn）色鏡檢,為（wéi）革蘭氏陰性小杆菌,再進一步可作生化和動物接種試（shì）驗。 2.病原的鑒定（dìng） (1)生（shēng）化反應 本菌在48小時內（nèi）可分解葡（pú）萄糖、果糖（táng）、單奶糖、庶糖和甘露醇等,產（chǎn）酸（suān）不產氣，一（yī）般對乳糖、鼠李糖、菊糖（táng）、水楊苷和肌醇（chún）等不發酵。可產生硫（liú）化氫和氨,能形成被基質,甲基紅(MR)試驗和維培二氏(V-P)試驗（yàn）均為陰性。接觸酶和氧化酶均為陽性。石蕊（ruǐ）牛乳無變（biàn）化（huà）,不（bú）液化明膠。 (2)動物（wù）接種試驗 取病（bìng）料在滅菌研缽中加生理鹽（yán）水 1：10製成乳劑,如作純培養的毒（dú）力鑒定,用（yòng）4%血清肉湯24 小（xiǎo）時培養液或取血平板上菌落製成生理鹽（yán）水菌液,皮下或腹腔（qiāng）接種小白（bái）鼠2－4隻,每隻注（zhù）射0.2毫升,一般經（jīng）10個小時左右致死。死亡小白鼠的呼吸道及消化道粘膜有出血小點,肝腫大、有壞死灶。取心血及肝髒塗片染色鏡檢,見大量兩極濃染的（de）細菌,即可確診。 (3)血清型鑒定 多殺性巴氏杆菌（jun1）可分為多種血清型。目前國際上公認的（de）分型方法是將特異（yì）性莢膜抗原吸附於（yú）紅細胞上,作被動血凝試（shì）驗,將本菌分為A,B,D,E 4個血清（qīng）群,又將菌（jun1）體抗原作凝集反應,將（jiāng）本菌分為12個（gè）血清型,用阿拉伯（bó）數字表示。豬巴氏杆菌的血清型以5：A和6： B為主。 抗原（yuán）和（hé）相應（yīng）的抗體在動物體內或體外（wài）都能發生特異性（xìng）結合（hé）反應,這種反應稱（chēng）為抗原抗（kàng）體反應,習慣（guàn）上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應,體外的抗原抗體反（fǎn）應稱為血清學反（fǎn）應, 因為抗體主要存在於血清。 血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原,也可用已知的抗原（yuán）測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原-抗體複合物（wù）的原理,設計（jì）了許多血清學診斷方（fāng）法（fǎ）,不僅可以（yǐ）檢測動物體內乃至體外的病原微生物,或其（qí）抗原性成分（fèn）,而且還可以測定動物機體對病原微生物侵襲或對其（qí）抗原成分的免疫反應。在抗原-抗體複合物呈不可見狀態時（shí）,可以通過（guò）瓊脂（zhī）擴（kuò）散、凝（níng）集（jí）試驗以及酶標（biāo）記等指示係統,使其變為可見或（huò）可測狀態。 由於血清學反應具有高度的特異性和敏感性,因此在獸醫學上廣泛用於對許（xǔ）多傳染病的診斷、病原微生物（wù）的鑒（jiàn）定及抗體的檢測等。 目前已知（zhī）的血清學診斷方法很多,隨著科（kē）學在術的進步,新方法、新技術還在不斷地出現,要求達到微量、準確、快（kuài）速、 簡便。 |
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