湖南省永州市雞感染 H7N9 流感病毒變異株的調查

禽流感（gǎn）（Avian influenza，AI）是由流感病（bìng）毒引（yǐn）起的禽類感染或疾病綜合征。流感病毒屬於RNA 病毒的（de）正黏病毒（dú）科，其最顯著的生物學特性是亞型眾多、變異頻繁。其分子機製涉及點突變引起的抗原漂移（Antigenic drift）和不同亞（yà）型毒株同源重組產生新亞型所引起（qǐ）的抗原轉（zhuǎn）變（Antigenicshift）[1]。流感病毒根（gēn）據兩個蛋白抗原性的不同，可被分為 16 個 HA 亞型（H1~H16） 和 9 個 NA亞型（N1~N9），理論上流感病毒可組成 144 個亞型 [2]。高致病性禽流感病毒（dú）目前僅見於 H5、H7兩個亞型。它們從水禽傳給陸（lù）禽，經過幾代傳播以後，從低（dī）致病性演變成高致病性病毒。關於（yú） H7N9流感病毒（dú）變異株分子特征、人感染後的臨床症狀（zhuàng）已有報道 [3]，但未見禽感染 H7N9 流（liú）感病毒變異株臨床特征的報道。因此，研究（jiū）禽感染 H7N9 流感病毒變異株的臨床特征及變異株的來源，對重（chóng）大動物疫病防控是（shì）有意義的。

1　材料與方（fāng）法

1.1 病例來（lái）源

發病雞來自湖南省永州市東安縣（xiàn）端橋鋪鎮某一起雞感染 H7N9 流感病毒變異株的調查養禽場。該（gāi）禽場存（cún）欄蛋雞 6 000 餘羽，品種為海蘭灰，320 日（rì）齡。至發病第 4 日，累計死亡 102 羽。分別隨機采集 8 隻發病（bìng）雞的咽 / 肛拭子（zǐ）及血（xuè）液樣品，備用。

1.2　流行病學調查

向養殖（zhí）戶、飼養（yǎng）員、防疫技術員詢問關於雞發病（bìng）的相關信息，並對（duì）飼料、用藥進行取證調（diào）查。

1.3　病（bìng）理解（jiě）剖（pōu）

隨機選擇 8 隻（zhī）發病（bìng）雞（jī）進行臨床解剖，對（duì）發病雞（jī）的氣管、心髒、肝髒、腎髒等器（qì）官進行病理（lǐ）解剖並拍照，做好記錄。

1.4　實（shí）驗室檢測

1.4.1　檢測試劑。禽流（liú）感病毒 H5（Re-6 株）、H7 亞型血凝抑製試驗抗原（哈爾濱維科生物技術開發公司出品（pǐn），批號 201605）；禽流感病毒 H5/H7/H9 型實時熒光 RT-PCR 檢測試劑盒（深圳生科源生物科技有限公司產品（pǐn），批號 201506）。

1.4.2　檢測方法（fǎ）。關於禽流感病原學檢測，按禽流感病（bìng）毒熒光 RT-PCR 檢測方法（GB/T 19438.1—2004）。從樣（yàng）品中提取病毒 RNA 後，以實時熒光定量反轉錄 - 聚合酶鏈反應法（real-time RT-PCR）檢測 H5/H7/H9 亞型核酸。關於禽流感抗體檢測，按高致病性禽流感診斷技術（GB/T 18936—2003）進行血凝和血凝抑製試驗，並記錄相關數據。

1.4.3　數據處理。將有關數據錄入 Excel 2003軟件（jiàn），通過 SPSS 13. 0 軟件進（jìn）行統計分析（xī），使用GraphPad Prism 5 軟件製圖。

2　結果與分析

2.1　流行病調（diào）查結果

發病前 100 d，養雞場實施過 H5 亞（yà）型流感疫苗和“H5+H9”聯苗（廣東永（yǒng）順）免疫，飼養狀況良好，並無其他烈性發病情（qíng）況。發病後的前 4 天，分別死亡 10、18、31、102 羽（圖 1）；死亡的前幾天，病雞（jī）采食量、產蛋量無明顯變化，外觀正常；至瀕死日，呈（chéng）現明顯的外觀症狀：精（jīng）神萎靡、頭部腫大、肉髯發紺、流（liú）淚、口流涎（圖 2），也有部分（fèn）雞（jī）在采食過程中突然死亡。由於雞發病迅猛，死亡快，無（wú）腳趾出血症狀。

圖 1　發病禽場日死亡數量

首頁前一頁（yè）123後一頁尾頁